5月28日，Science雜志報道一位名叫Amy Boland的淋巴瘤患者的抗癌故事。Amy Boland與淋巴瘤對抗多年，還曾接受過CAR-T療法，但是仍出現(xiàn)復發(fā)，最終在接受了雙特異性抗體治療后，淋巴瘤消失了，直到現(xiàn)在也沒有復發(fā)。

圖片來源：Science

Boland在12年前注意到自己腋下出現(xiàn)腫塊，之后被告知患了淋巴系統(tǒng)癌癥。她在此后的治療中經(jīng)歷了病情多次反復，常規(guī)化療幫助她縮小了淋巴瘤腫瘤，但腫瘤隨后又卷土重來。而骨髓移植、免疫檢查點抑制劑等一系列療法，要么失敗了，要么只是暫時緩解了她的癥狀。在最近的一次CAR-T療法嘗試中，醫(yī)生們采集了她的T細胞并進行體外設計，以使它們更有針對性地殺死Boland的癌細胞。在將這些設計過的T細胞回輸?shù)剿捏w內(nèi)后，癌癥消失了，但兩年后又復發(fā)了。

Amy Boland（圖片來源：Science/MARY BOLAND）

“似乎沒有什么療法能真正對她起作用”，賓夕法尼亞大學的腫瘤學家Stephen Schuster說。

2018年10月，Boland加入了一項臨床試驗，嘗試另一種利用她的免疫系統(tǒng)來殺死腫瘤細胞的方法。這項由Schuster參與主導的臨床試驗主要是測試一種雙特異性抗體藥物mosunetuzumab（羅氏的CD3×CD20雙抗）的療效。mosunetuzumab通過“分子繩”結構一邊結合天然T細胞，一邊結合淋巴瘤細胞，從而將這對“天敵”拉在了一起，發(fā)揮免疫細胞的靶向攻擊作用。

就像早些時候接受CAR-T療法一樣，Boland在初始注射藥物后會感到不適，得在醫(yī)院里呆幾個晚上，但這種抗體很快緩解了她的病情。一直到今天，在停藥 mosunetuzumab一年多后，60歲的Boland似乎遠離了癌癥，過著正常的生活。

“我感覺很好，真的非常感激”，Boland說。

Boland參與的這項臨床試驗也在2019年12月成為了頭條新聞。在2019年美國血液學會（ASH）年會上，Schuster報告稱：在124例接受其他療法失敗的患者中，46例疾病進展的非霍奇金淋巴瘤患者在注射了mosunetuzumab之后腫瘤縮小 。在同一個會議上，另一項小型臨床試驗數(shù)據(jù)表明，雙特異性抗體對另一種血液癌癥多發(fā)性骨髓瘤也同樣有效。

抗體協(xié)會的執(zhí)行主任Janice Reichert表示：“針對癌癥的雙特異性抗體已成為超級熱門”。

幾十年來，科學家們一直致力于研究雙特異性抗體類抗癌藥物，第一次取得臨床成功是在12年前，這一結果在一段時間內(nèi)快速推動了這一領域的發(fā)展，之所以沒有CAR-T療法率先引起轟動的部分原因在于雙抗分子的設計和生產(chǎn)具有挑戰(zhàn)性。不過，生物技術公司現(xiàn)在已經(jīng)能使這些雙抗類大分子藥物更加安全和有效，這些抗體正在數(shù)十項臨床試驗中進行測試，期望它們能與CAR-T療法競爭或超越CAR-T療法。

約翰霍普金斯大學醫(yī)學血液學家Robert Brodsky說：“如果雙特異性抗體能像CAR-T細胞那樣發(fā)揮作用，這將是一個巨大的進步和根本性改變”。雙特異性抗體的一個主要優(yōu)點是它們可以預先批量生產(chǎn)。相比之下，CAR-T療法需要給每個癌癥患者個性化制備CAR-T細胞。這一過程代價高昂，而且對一些重病患者來說，花費的時間太長。

不過，對于某些血液癌癥，雙特異性抗體并不能給患者帶來類似CAR-T療法中所觀察到的長期緩解。正如CAR-T療法所發(fā)生的那樣，一些患者在測試雙特異性抗體的試驗中死亡，可能是由于藥物引發(fā)了過度免疫反應。而雙特異性抗體對實體瘤（如結腸癌和肺癌）的治療效果可能不如像對血液腫瘤和淋巴腫瘤那樣有效，CAR-T細胞也有同樣的缺陷。

“抗體領域存在很多眾所周知的問題。但這也是一個快速發(fā)展的領域，很多真正聰明的人都在致力于此。”羅氏子公司Genentech的抗體研究人員Paul Carter說道。

單克隆抗體作為一種癌癥治療方法有著悠久的歷史。這種Y形蛋白與病毒、細菌或其它微生物上的抗原結合后能夠可以直接破壞和清除病原體，也可以向免疫系統(tǒng)發(fā)出攻擊病原體的信號。研究人員首先通過復制一種可以附著在腫瘤細胞特定抗原上的特異性抗體來學習利用這種天然系統(tǒng)，這標志人們發(fā)現(xiàn)了腫瘤細胞可以被免疫系統(tǒng)的非T細胞成分殺滅的方法。一些最有效、最暢銷的抗癌藥物就是這樣的單克隆抗體，包括乳腺癌藥物赫賽汀（曲妥珠單抗）。

較新的抗癌策略利用了T細胞。對人體來說，腫瘤細胞可以表現(xiàn)出足夠的外源性，有時能訓練T細胞去攻擊它們。CAR-T細胞是為T細胞裝載了一個可以靶向癌細胞抗原的受體，從而實現(xiàn)更強大的應答。檢查點抑制劑是一類解除T細胞抑制狀態(tài)的藥物，也能激活T細胞攻擊腫瘤細胞。

雙特異性抗體提供了利用T細胞的第3種方法。在20世紀80年代中期，研究人員開始設計有兩個tips的抗體，一個與腫瘤細胞抗原結合，另一個與T細胞表面的CD3蛋白相匹配。這個想法是直接將T細胞與腫瘤細胞聯(lián)系起來，從而跳過了T細胞學習攻擊癌癥的必要步驟。1985年，Nature雜志上的兩篇報道稱這種雙特異性抗體可以破壞培養(yǎng)皿中的癌細胞并能縮小小鼠體內(nèi)的腫瘤，這無疑激發(fā)了該領域的研究熱情。

圖片來源：Science/C. BICKEL

但當雙特異性抗體從細胞和實驗動物轉移到癌癥患者身上進行測試時，這種興奮感就消失了。在早期臨床試驗中，盡管一種抗體顯示出縮小淋巴瘤的能力，但研究人員不得不在得出最終結果前停止給藥，因為這些抗體的制造商已經(jīng)用完了藥物。雙特異性抗體類藥物的生產(chǎn)在當時很難，為了獲得理想的雙特異性抗體，科學家要在他們所獲得的多個版本的分子中進行艱難的篩選。

雙特異性抗體有時也會引發(fā)嚴重的副作用，包括肝損傷和過度免疫反應，其中白細胞會分泌大量有毒的細胞因子信號。這樣的細胞因子“風暴”會導致發(fā)燒，嚴重時還會導致器官損傷（CAR-T細胞也會引起同樣的過度免疫反應）。

慕尼黑大學的兩位免疫學家Peter Kufer和Gert Riethmüller努力推進了一個在許多同事看起來會失敗的想法：一種簡化的雙特異性抗體，其兩個tips由一種柔性肽而不是傳統(tǒng)的stem連接。簡化的設計使得抗體的制造更容易，但由于stem的缺失，腎臟在2小時內(nèi)會將其從血液中清除。在這種抗體的第一次臨床試驗中，非霍奇金淋巴瘤患者必須戴上泵持續(xù)注入抗體。盡管如此，在由德國生物技術公司Riethmüller聯(lián)合發(fā)起、Micromet公司主導開展的試驗中，7例淋巴瘤患者接受這種小劑量的雙抗藥物仍然全部都實現(xiàn)了腫瘤縮小。Micromet的首席科學官Patrick Baeuerle對此表示驚奇，并將這種藥物稱為雙特異性T細胞銜接器（bispecific T cell engager，BiTE?）。這項小型研究于2008年發(fā)表在Science雜志上，引起了生物技術公司和學術界的濃厚興趣。

正大天晴PD-L1啟動一線治療三陰性乳腺癌III期臨床

6月1日，正大天晴登記啟動TQB2450聯(lián)合安羅替尼對比注射用紫杉醇一線治療三陰性乳腺癌隨機、陽性藥物平行對照、多中心III期臨床試驗。 來源：藥物臨床試驗登記與信息公示平臺 該項試驗將在國內(nèi)33個臨床試驗機構開展，計劃入組322例初診Ⅳ期或復發(fā)/轉移性、且不...

“整個領域都意識到這是一件大事，我們希望參與其中。”生物技術公司Xencor首席科學官John Desjarlais說道。

大約在同一時間，CAR-T療法開始在一些白血病患者身上顯示出令人印象深刻的結果，這也提高了人們對其他更簡單的免疫療法（如雙特異性抗體）的興趣。像CAR-T細胞一樣，被BiTE刺激的T細胞釋放出一種叫做顆粒酶和穿孔素的有毒分子，這些分子在腫瘤細胞上打孔，使腫瘤細胞自毀。

美國國家癌癥研究所癌癥治療評估項目的高級研究員Elad Sharon說：“我認為雙特異性抗體就像是‘現(xiàn)貨型’的CAR-T細胞”。

2009年，第一種針對癌癥的雙特異性抗體在歐洲獲得批準。它本來是用來清除一些癌癥患者體內(nèi)導致腹腔積液的惡性細胞，但效果不太好，所以這種藥物只在市場上銷售了幾年。安進公司于2012年收購了Micromet，基于后者BiTE?平臺開發(fā)的雙抗藥物Blincyto（blinatumomab）使晚期急性淋巴細胞白血病患者的生存時間增加了一倍。雙抗領域的研究自此又恢復了勢頭。從2014年開始，F(xiàn)DA批準該藥治療幾種成人和兒童疾病。安進公司目前正在測試用于治療其他癌癥（包括骨髓瘤、肺癌、前列腺癌和腦癌）的BiTE藥物。

另一些公司則急于通過使用蛋白質工程技術制造所需的雙特異性抗體來改進BiTE。一些公司已經(jīng)恢復了抗體的stem，這樣蛋白質在血液中停留的時間更長，但經(jīng)過修改后，其對肝臟的毒性也變得更小。像Boland這樣的癌癥患者不再需要戴上裝有泵的藥包，現(xiàn)在他們可以每3周靜脈滴注一次這種藥物。

科學家們還將腫瘤抗原結合位點的第二個拷貝添加到抗體的一個tip上（見上張圖）。這種被稱為“2+1”雙特異性抗體的特殊設計是為了使抗體對癌細胞更具選擇性，并且不太可能靶向攜帶少量癌抗原的健康細胞。

為了降低引發(fā)細胞因子風暴的風險，研究人員還設計了一種雙特異性抗體，它可以捕捉一種叫做自然殺傷細胞（NK）的免疫細胞，替代T細胞。一些公司已經(jīng)開始或正在準備對這種與NK細胞表面蛋白CD16結合的抗體進行臨床試驗。

賽諾菲公司癌癥免疫學主管Dmitri Wiederschain說：“NK細胞如果被激活將是非常有效的腫瘤細胞殺手，而且這種免疫細胞導致的細胞因子釋放會顯著減少。”。

這些新版本的雙特異性抗體現(xiàn)在更容易合成了。生物化學家Christoph Rader說：“抗體工程已經(jīng)很成熟了，使這些分子變得相當有效是可能的”。

根據(jù)抗體協(xié)會執(zhí)行主任Janice Reichert的統(tǒng)計，全超過60種針對癌癥的T細胞定向雙特異性抗體正在進行早期或晚期臨床試驗。據(jù)安進公司去年報道，在一些晚期前列腺癌患者身上，其BiTE顯示出了使腫瘤縮小的跡象。

對于雙特異性抗體來說，實體腫瘤是具有挑戰(zhàn)性的，部分原因是實體腫瘤往往缺乏獨特的抗原讓抗體捕獲。許多腫瘤也被血管、組織和免疫細胞包圍，這形成了T細胞不易穿透的屏障。不過，紀念斯隆·凱特林癌癥中心的Nai-Kong Cheung說，小鼠研究的結果表明，一些雙特異性抗體可以將T細胞帶入腫瘤。他的實驗室已經(jīng)系統(tǒng)地調整了設計因素，例如如何排列結合位點，以了解是什么優(yōu)化分子的效力。

此外，一些公司還希望用可以同時結合CD3以及T細胞表面另一個被稱為“第二信號”蛋白（CD28）的雙特異性抗體來增強對實體腫瘤的攻擊。再生元高級副總裁Israel Lowy提到：“因為一種被設計用來結合CD28的抗體在2006英國臨床試驗中使6名健康志愿者因細胞因子釋放綜合征病危，多年來業(yè)界一直害怕觸碰稱為CD28的蛋白質。”

然而新研究表明，安全地利用CD28是有可能的。去年在Nature Cancer雜志上，賽諾菲的一個研究小組報告說，一種與CD28、CD3和癌癥抗原相匹配的三特異性抗體消滅了小鼠的骨髓瘤。其他公司已經(jīng)通過制造兩種雙特異性分解了這個“任務”：一種靶向腫瘤抗原和CD28或另一種生長信號受體；另一種結合腫瘤抗原和CD3。

“我們希望這種共刺激的雙特異性抗體可以幫助我們在實體腫瘤中實現(xiàn)應答”，Lowy說道。再生元在一月份的Science Translational Medicine雜志上報告稱，這種兩種藥物的組合可以縮小小鼠卵巢腫瘤和減緩前列腺腫瘤的生長。

下一代的雙特異性抗體是否會讓CAR-T療法黯然失色？CAR-T療法先驅、賓夕法尼亞大學的Carl June對此持懷疑態(tài)度。他指出，許多接受過blinatumomab治療的白血病患者最終會復發(fā)，因為癌細胞對這種藥物產(chǎn)生了抗藥性，所以腫瘤學家主要把它作為一種“橋梁”，直到病重的患者能夠得到干細胞移植或CAR-T細胞治療。June補充說，雙特異性抗體在許多T細胞被清除或耗盡的癌癥患者中可能不起作用，因為剩下用于攻擊癌細胞的免疫細胞太少了。相比之下，CAR-T療法通過在體外培養(yǎng)細胞來補充免疫系統(tǒng)，這是雙特異性抗體不可能做到的。

Stephen Schuster在兩個研究領域都有所涉及。他負責Boland的研究，并與June共同主導CAR-T療法試驗。他指出，雙特異性抗體仍在證明自己。安進公司去年的一份報告顯示一些對blinatumab反應良好的淋巴瘤患者在7年后仍然活著，這表明他們可以長期處于緩解期。Schuster表示：“我相信，在未來的2到5年內(nèi)，雙特異性抗體針對包括實體瘤在內(nèi)的耐藥腫瘤的治療能力將有質的飛躍”。

Amy Boland的癌癥掃描顯示，從她的雙特異性抗體治療開始（左）到12周后（右），她的淋巴瘤腫瘤顯著消失。（圖片來源：Science/ PENN MEDICINE）

Stephen Schuster和其他癌癥研究者認為CAR-T細胞、檢查點抑制劑和雙特異性抗體是可以互換的。“為什么不嘗試結合所有這些療法呢？所有這些調控免疫系統(tǒng)治療癌癥的方法本質上是異曲同工的”，Schuster說道。

他正在準備一項試驗，給病人提供CAR-T細胞，然后是一種雙特異性藥物。不過，加倍治療可能有風險。去年在這樣的一個試驗中，兩名患者在出現(xiàn)細胞因子釋放綜合征后死亡。

在與淋巴瘤的斗爭中，Boland親眼看到3個孩子長大并上了大學，她對這一現(xiàn)狀表示滿意。她說：“我希望能持續(xù)下去，但如果不能，我相信總會有更多的治療方法。不用擔心，因為沒人知道接下來會發(fā)生什么。”

參考資料：

Designer antibodies fight cancer by tethering immune cells to tumor cells （來源：Science）